@phdthesis{oai:sucra.repo.nii.ac.jp:00010324, author = {柿本, 真之}, month = {}, note = {72p, 第1章 ..................................................................................................................................... 1 1.1. はじめに ...................................................................................................................... 2 1.1.1. カビ臭による被害 ................................................................................................. 2 1.1.2. 湖沼・貯水池での異臭発生とその防止法 ............................................................. 2 1.1.3. シアノバクテリアの増殖因子 ............................................................................... 3 1.1.4. カビ臭原因物質 ..................................................................................................... 4 1.1.5. ジェオスミン及び2-MIB 産生種.......................................................................... 5 1.1.6. ジェオスミン合成経路と関連遺伝子の単離 ......................................................... 6 1.1.7. シアノバクテリアのジェオスミン合成遺伝子 ..................................................... 8 1.1.8. ジェオスミン遺伝子のモニタリング手法の開発 .................................................. 8 1.1.9. 放線菌より単離された2-MIB 合成関連遺伝子 .................................................... 9 1.1.10. GPPMT 及びMIBS の機能解析 ....................................................................... 10 1.1.11. シアノバクテリアにおけるGPPMT 及びMIBS 遺伝子の単離 ...................... 11 1.1.12. 遺伝子の発現解析 ............................................................................................. 13 1.1.13. MIB タンパク質の構造解析 .............................................................................. 13 1.2. 本論文の概要 ............................................................................................................. 14 1.2.1. 本論文の目的と意義 ........................................................................................... 14 1.2.2. 本論文の構成 ...................................................................................................... 15 第2章 ................................................................................................................................... 17 2.1. はじめに .................................................................................................................... 18 2.2. 実験方法 .................................................................................................................... 19 2.2.1. 使用株と培養条件 ............................................................................................... 19 2.2.2. DNA 抽出 ............................................................................................................ 21 2.2.3. 遺伝子の単離 ...................................................................................................... 21 2.2.4. クローニング ...................................................................................................... 22 2.2.5. シークエンス ...................................................................................................... 22 2.2.6. オペロンの解析 ................................................................................................... 23 2.3. 結果 ............................................................................................................................ 23 2.3.1. pgmtf 配列の決定 ................................................................................................ 23 2.3.2. pgmtc 配列の決定 ................................................................................................ 24 2.3.3 オペロンにおけるpgmtf とpgmtc の配置........................................................... 24 2.4. 考察 ............................................................................................................................ 25 第3章 ................................................................................................................................... 36 3.1. はじめに .................................................................................................................... 37 3.2. 実験方法 .................................................................................................................... 38 3.2.1. 培養条件の検討 ................................................................................................... 38 3.2.2. 2-MIB 濃度の測定 ............................................................................................... 38 3.2.3. 温度処理実験における培養条件 ......................................................................... 39 3.2.4. RNA 抽出 ............................................................................................................. 39 3.2.5. cDNA 合成 ........................................................................................................... 40 3.2.6. Real-time RT-PCR による発現解析.................................................................... 40 3.3. 結果 ............................................................................................................................ 41 3.3.1. P.galeata の増殖に対する温度の影響 ................................................................. 41 3.3.2. 低温における発現解析 ........................................................................................ 41 3.3.3. 高温における発現解析 ........................................................................................ 41 3.4. 考察 ............................................................................................................................ 42 第4章 ................................................................................................................................... 48 4.1. はじめに .................................................................................................................... 49 4.2. 実験方法 .................................................................................................................... 50 4.2.1. 培養条件 .............................................................................................................. 50 4.2.2. キャピラリー電気泳動による代謝解析 .............................................................. 50 4.2.3. データ解析 .......................................................................................................... 50 4.3. 実験結果 .................................................................................................................... 52 4.3.1. 化合物の測定 ...................................................................................................... 52 4.3.2. 主成分分析 .......................................................................................................... 52 4.3.3. クラスター解析及びヒートマップ ...................................................................... 52 4.3.4. 培養温度による代謝変動 .................................................................................... 52 4.3.5. 相関解析 .............................................................................................................. 52 4.4. 考察 ............................................................................................................................ 53 第5章 ................................................................................................................................... 60 5.1. 本研究のまとめ ......................................................................................................... 61 5.2. 今後の展望 ................................................................................................................. 62 参考文献 ................................................................................................................................ 63 活動実績 ................................................................................................................................ 70 謝辞 ....................................................................................................................................... 72, 主指導教員 : 川合真紀, text, application/pdf}, school = {埼玉大学}, title = {シアノバクテリアのカビ臭生成における遺伝子発現及び代謝経路の解析}, year = {2014}, yomi = {カキモト, マサユキ} }